Питательная среда Агар МакКонки (MacConkey Agar)

Описание и характеристики

Агар МакКонки - это питательная среда, которая используется для выборочного выделения и идентификации энтеробактерий из фекалий, мочи, сточных вод и пищевых продуктов. Кроме того, она является дифференциальной средой для выделения кишечных грамотрицательных бактерий.

Этот агар обладает высокими показателями роста благодаря содержанию в нем пептоновой смеси и желатина, которые содержат в себе питательные элементы, такие как азот, витамины и минеральные соли.

В состав среды также входят соли желчных кислот и кристаллический фиолетовый, которые подавляют рост грамположительных микроорганизмов.

Панкреатический гидролизат желатина и пептоновая смесь являются источниками питательных веществ, которые необходимы для роста микроорганизмов, таких как азот, витамины, минеральные соли и аминокислоты. Лактоза в среде является ферментируемым углеводом, который является источником углерода и энергии для микроорганизмов. Хлорид натрия в среде поддерживает осмотический баланс.

Соли желчных кислот и кристаллический фиолетовый являются селективными агентами, которые ингибируют рост грамположительных организмов. Нейтральный красный в качестве индикатора pH позволяет отслеживать процесс ферментации лактозы, который сопровождается изменением цвета индикатора на розовый цвет вследствие понижения уровня pH.

Состав набора

Готовая к использованию среда

• Ч0820 упаковка 20 или 100 чашек Петри (90 мм)
• Ф0820 упаковка 6 флаконов по 200мл

Состав среды

Панкреатический гидролизат желатина	17,0	Моногидрат лактозы	10,0
Хлорид натрия	5,0	Пептоновая смесь (мясной и казеиновый)	3,0
Соли желчных кислот	1,5	Кристаллический фиолетовый	0,001
Нейтральный красный	0,03
Бактериологический агар	13,5

Конечная величина pH 7,1±0,2 при 25°C

Меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro.
• К работе допускается только квалифицированный персонал.
• Данный набор содержит вещества животного происхождения. Сертификат происхождения и/или санитарного состояния животных, от которых были получены данные материалы, не гарантирует отсутствия трансмиссивных патогенных микроорганизмов. Рекомендуется обращаться с этими веществами как потенциально опасными и в соответствии с принятыми нормами (не вдыхать, не глотать).
• При работе с образцами и микробными культурами необходимо соблюдать стерильность в соответствии с законодательством и нормативными актами Российской Федерации, соблюдение "Правил устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах) санитарно-эпидемиологических учреждений системы Министерства здравоохранения СССР" (Москва, 1981 г.).
• Не используйте среды в качестве компонентов и сырья для производства.
• Не используйте реактивы по истечении срока годности.
• Не используйте флаконы и чашки со следами контаминации.
• Перед использованием убедитесь в целостности упаковки и емкости.
• При работе следуйте инструкции. Любые изменения описанной процедуры могут привести к искажению результатов.
• При интерпретации результатов необходимо принимать во внимание анамнестические данные больного, источник выделения микроорганизма, морфологию колоний, данные клеточной микроскопии, а также результаты других проведенных исследований.

Необходимые реактивы и материалы, не включенные в набор

1. Термостат.
2. Водяная баня.

Анализируемые образцы

Медицинская бактериология:

Данная среда предназначена для работы с любыми клиническими образцами, которые могут содержать энтеробактерии. Образцы не требуют обработки и дополнительной подготовки.

Промышленная микробиология:

Данная среда рекомендована для контроля качества нестерильных фармацевтических продуктов. Среда описана во многих фармакопеях.

Данную среду можно также использовать для определения энтеробактерий в воде и молочных продуктах.

Соблюдайте правила транспортировки и хранения образцов.

Проведение анализа

При необходимости подготовки чашек со средой: 1. Ослабьте крышку флакона.

2. Расплавьте агар на водяной бане, оснащенной системой безопасности (около 45 минут). 3. Плотно закройте крышку и перемешайте.

4. Оставьте флаконы при комнатной температуре минимум на 15 секунд, затем перенесите в термостатируемую водяную баню, установленную на 45-50°C. Оставьте на бане при этой температуре вплоть до использования.

5. Перемешайте и разлейте по чашкам (18-20 мл на чашку).

Посев и инкубация:

Медицинская бактериология:

1. При разливе среды из флаконов, выдержите чашки до достижения комнатной температуры. 2. Засейте чашки сразу после получения образцов.

3. Инкубируйте чашки в перевернутом положении (вверх дном) при 37°C. Необходимо правильно выбрать условия культивирования, в соответствии с действующими рекомендациями и стандартами. Как правило, учет результатов производят через 24-48 часов культивирования.

Промышленная микробиология:

Фармацевтические продукты: Среда МакКонки с кристаллическим фиолетовым рекомендован различными фармакопеями для определения Escherichia coli в нестерильных фармацевтических продуктах.

1. Выдержите чашки до достижения комнатной температуры.
2. Произведите посев предварительно обогащенного образца.
3. Инкубируйте чашки в перевернутом положении (вверх дном) при 35-37°C. Учет результатов производят через 18-72 часа культивирования.

Вода и молочные продукты:

При исследовании воды образец вносится непосредственно на чашку. Для определения и количественного учета энтеробактерий в молоке и воде см. A.P.H.A, Стандартные методы исследования молочных продуктов, 11-е издание, а также Стандартные методы исследования воды и сточных вод.

Регистрация результатов

• По окончании инкубации оцените бактериальный рост и внешний вид колоний:
• Сбраживающие лактозу микроорганизмы: розовые или красные колонии, иногда окруженные ореолом выпавших в осадок солей желчных кислот.
• Не сбраживающие лактозу микроорганизмы: бесцветные или бежевые колонии.

Для идентификации пользуйтесь биохимическими и/или иммунологическими методами.

КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА Характеристика колоний

• E. coli. Красные или розовые; не слизистые; округлые; матовый осадок желчных солей.
• Salmonella spp. Бесцветные, прозрачные или янтарные.
• Klebsiella spp. Крупные, красные, слизистые.
• Shigella spp. Бесцветные, прозрачные или слабо розовые.
• Enterobacter aerogenes. От розового до красного цвета.
• Serratia spp. От красного до розового цвета, не слизистые.
• Arizona spp. и Citrobacter spp. Бесцветные, прозрачные; красные в случае ферментации лактозы.
• Proteus spp. Бесцветные, прозрачные.

Примечание:

Сотрудники лаборатории несут ответственность за проверку качества среды (частота, количество штаммов, температура культивирования и пр.) в соответствии с целями работы и установленными нормами и правилами.

ОГРАНИЧЕНИЯ МЕТОДА

1. Некоторые штаммы, имеющие специфические ростовые потребности, могут не образовать колоний на данной среде.
2. Данная среда может быть использована в сочетании с другой селективной средой, в зависимости от типа образца и целей исследования.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

В исследовании использовали 34 бактериальных штамма (энтеробактерии, другие грамм(-) и грамм(+) бактерии). Культивирование осуществляли при 37°C.

Питательные качества среды:

Все энтеробактерии образовали колонии за 24 часа. Семь сбраживающих лактозу штаммов образовали темно-розовые или красные колонии, при этом некоторые колонии E. coli были окружены преципитатом солей желчных кислот. Прочие грам(-) бактерии (не относящиеся к группе энтеробактерий) дали слабый рост.

Селективные свойства:

Рост 8 штаммов грам(+) микроорганизмов ингибировался в течение 48 часов.

ХРАНЕНИЕ

1. Флаконы с агаром следует хранить в оригинальной упаковке при 2-8°C до истечения срока годности.
2. Чашки с агаром следует хранить в оригинальной упаковке при 2-8°C до истечения срока годности. После вскрытия упаковки хранить не более 2 недель в целлофановом пакете при 2-8°C.

УТИЛИЗАЦИЯ ОТХОДОВ
Утилизируйте отходы в соответствии с требованиями, предъявляемыми для утилизации инфекционных материалов. Ответственность за утилизацию несут сотрудники лаборатории.

ГАРАНТИЙНЫЕ ОБЯЗАТЕЛЬСТВА ПРОИЗВОДИТЕЛЯ

При соблюдении соответствующих правил и инструкций - в пределах срока годности, указанной на упаковке продукта. По вопросам, касающимся качества набора, следует обращаться по адресу

192102 Санкт Петербург Волковский пр 6 лит А тел (812)646-68-64

Инструкция

Действующая инструкция на готовую питательную среду предоставляется производителем по запросу.